Определение резус фактора цоликлонами

Содержание
  1. Об утверждении инструкций по иммуносерологии
  2. Приложение 3. ИНСТРУКЦИЯ по определению групп крови системы АВО при помощи стандартных изогемагглютинирующих сывороток
  3. Что такое цоликлон
  4. Проведения анализа
  5. Приложение 1. ИНСТРУКЦИЯ по предупреждению несовместимости при переливании крови
  6. Полезные советы
  7. Реакция со стандартными эритроцитами
  8. Техника определения групп с помощью цоликлонов
  9. Что это за метод?
  10. Плюсы и минусы методов
  11. Приложение 8. ИНСТРУКЦИЯ по определению резус-принадлежности крови на плоскости без подогрева и по изготовлению стандартной сыворотки и реактива антирезус, предназначенных для этой цели
  12. Как определить группу в случае неверной трактовки результатов анализа
  13. Приложение 19. ИНСТРУКЦИЯ по изготовлению консервированных стандартных эритроцитов и их применению в изосерологических исследованиях

Об утверждении инструкций по иммуносерологии

В целях совершенствования системы обеспечения иммунологической безопасности переливания крови и ее компонентов, профилактики посттрансфузионных реакций и осложнений

1. Инструкцию по предупреждению несовместимости при переливании крови (приложение 1).

2. Инструкцию по изготовлению стандартных изогемагглютинирующих сывороток для определения группы крови системы АВО (приложение 2).

3. Инструкцию по определению группы крови системы АВО при помощи стандартных изогемагглютинирующих сывороток (приложение 3).

4. Инструкцию по применению цоликлонов анти-А, анти-В и анти-АВ диагностических жидких для определения группы крови системы АВО (антитела моноклональные анти-А, анти-В, анти-АВ) (приложение 4).

5. Инструкцию по изготовлению стандартных сывороток и реагента антирезус (приложение 5).

6. Инструкцию по удалению из сывороток антирезус антител другой специфичности (приложение 6).

7. Инструкцию по определению резус-принадлежности крови (приложение 7).

8. Инструкцию по определению резус-принадлежности крови на плоскости без подогрева и по изготовлению стандартной сыворотки и реактива антирезус, предназначенных для этой цели (приложение 8).

9. Инструкцию по применению цоликлона анти-D диагностического жидкого для определения D антигена системы резус (антитела моноклональные анти-D) (приложение 9).

10. Инструкцию по применению анти-D IgM моноклонального реагента для определения резус-принадлежности (цоликлона анти-D супер) (приложение 10).

11. Инструкцию по исследованию сыворотки на наличие резус-антител (приложение 11).

12. Инструкцию по изготовлению редких сывороток, предназначенных для определения различных изоантигенов эритроцитов человека (приложение 12).

13. Инструкцию по применению цоликлона анти-С моноклонального для определения антигена С системы резус на эритроцитах человека (цоликлон анти-С супер) (приложение 13).

14. Инструкцию по применению цоликлона анти-Е оноклонального для определения антигена Е системы резус на эритроцитах человека (цоликлон анти-Е супер) (приложение 14).

15. Инструкцию по предупреждению посттрансфузионных осложнений, обусловленных факторами Kell и c(hr’) (приложение 15).

16. Инструкцию по иммунизации доноров для получения сыворотки и иммуноглобулина антирезус (приложение 16).

17. Инструкцию по взятию и учету крови, получаемой от доноров малыми дозами, для приготовления стандартных эритроцитов (приложение 17).

18. Инструкцию до определению иммунных антител групповой системы АВО (приложение 18).

19. Инструкцию по изготовлению стандартных эритроцитов и их применению в изосерологических исследованиях (приложение 19).

2) Руководителям органов управления здравоохранением субъектов Российской Федерации обеспечить неукоснительное применение утвержденных инструкций.

3) Управлению-организации медицинской помощи населению, Управлению охраны здоровья матери и ребенка обеспечить контроль за своевременным внедрением в практику и качеством проведения иммуносерологических исследований.

1. Инструкцию по предупреждению несовместимости при переливании крови, утвержденную Минздравом СССР 05.12.90 N 05-14/37-14.

2. Инструкцию по изготовлению стандартных изогемагглютинирующих сывороток для определения групп крови системы АВО, утвержденную Минздравом СССР 07.09.90 N 05-14/26.

3. Инструкцию по определению групп крови системы АВО при помощи стандартных изогемагглютинирующих сывороток, утвержденную Минздравом СССР 07.09.90 N 05-14/27.

4. Инструкцию по изготовлению стандартных сывороток и реагента антирезус, утвержденную Минздравом СССР 07.09.90 N 05-14/28.

5. Методические рекомендации “Удаление из сыворотки антирезус антител другой специфичности”, утвержденную Минздравом СССР 27.11.90 N 10-11/136.

6. Инструкцию по определению резус-принадлежности крови, утвержденную Минздравом СССР 07.09.90 N 05-14/29.

7. Инструкцию по определению резус-принадлежности крови на плоскости без подогрева и по изготовлению стандартной сыворотки и реактива антирезус, предназначенных для этой цели, утвержденную Минздравом СССР 06.12.90 N 05-14/38-14.

8. Инструкцию по применению цоликлона анти-D диагностического жидкого для определения D антигена системы Резус (антитела моноклональные анти-D), утвержденную Минздравом СССР 21.08.90.

9. Инструкцию по исследованию сыворотки на наличие резус-антител, утвержденную Минздравом СССР 07.09.90 N 05-14/30.

10. Временную инструкцию по изготовлению сывороток редких групп, предназначенных для определения различных изоантигенов эритроцитов человека, утвержденную Минздравом СССР 26.03.79 N 06-14/3.

11. Методические рекомендации “Иммунизация доноров для получения сыворотки и иммуноглобулина антирезус”, утвержденную Минздравом СССР 27.11.90 N 10-11/138.

12. Инструкцию по взятию и учету крови, получаемой от доноров малыми дозами, для приготовления стандартных эритроцитов, утвержденную Минздравом СССР 14.10.76 N 06-14/1.

13. Методические рекомендации “Определение иммунных антител групповой системы АВО”, утвержденные Минздравом СССР 27.11.90 N 10-11/135.

1. Инструкцию по применению цоликлонов анти-А, анти-В и анти-АВ диагностических жидких для определения групп крови человека системы АВО (антитела моноклональные анти-А, анти-В, анти-АВ), утвержденную Минздравмедпромом России 17.03.95.

Определение резус фактора цоликлонами

2. Инструкцию по применению анти-Rh(o)(D) IgM моноклонального реагента для определения резус-принадлежности крови человека (цоликлона анти-D супер), утвержденную Минздравмедпромом России 14.07.94.

3. Инструкцию по применению цоликлона анти-rh'(C) моноклонального для определения антигена С системы Резус на эритроцитах человека (цоликлон анти-С супер), утвержденную Минздравмедпромом России 17.03.95.

4. Методические рекомендации “Способ выявления иммунных анти-А, анти-В антител в сыворотке крови человека”, утвержденную Минздравом РСФСР 15.09.89.

6. Контроль за исполнением настоящего приказа возложить на заместителя Министра Стародубова В.И.

МинистрТ.Б.Дмитриева

Приложение 3. ИНСТРУКЦИЯ по определению групп крови системы АВО при помощи стандартных изогемагглютинирующих сывороток

Веками ученые пытались узнать о человеческом организме как можно больше и научиться исцелять больных от любой болезни. Одним из важных параметров является определение группы крови цоликлонами.

Медицина выделяет у людей всего четыре группы крови не зависимо от половой или расовой принадлежности.

Иммунологические признаки, которые и составляют основное различие по группе эритроцитарных антигенов, передаются по наследству.

Что такое цоликлон

Определение группы крови с помощью различных лабораторных реагентов стандартный метод исследований. Информация группе крови крайне важна, особенно в тех случаях, когда человеку нужна экстренная помощь.

Перед хирургическим вмешательством обязательно определяется тип индивидуальных антигенных характеристик человека.

Та же процедура является обязательно для военнослужащих (информация указывается на форме), для женщин перед родами и т.д.

Определение групп крови цоликлонами сравнительно новый метод исследования. Этот анализ может проводиться на любом этапе стационарного лечения пациентов.

Для осуществления лабораторного исследования не требуется много времени, достаточно наличие всех необходимых химических веществ (цоликлонов) и простого оборудования.

Цоликлоны по сути являются одним из видов иммуноглобулинов (тип М). Это моноклональные антитела, которые были образованы с помощью генной инженерии. Цоликлоны получены в результате воздействия сыворотки на стерильных лабораторных мышей. Образовывается скопление жидкости в брюшной полости грызуна, которая содержит эти антитела.

Определение групп крови с помощью цоликлонов требует предварительной подготовки и действий согласно установленному алгоритму. Обстановка в помещении, в котором проводится анализ оговорена отдельно.

Температура воздуха должна быть не ниже 15 и не выше 25 градусов, иначе результат исследования не может считаться достоверным. В помещении не должно быть пыли, животных, насекомых и других факторов, которые могут физически повлиять на процесс проведения исследования.

Также проведение лабораторного анализа требует хорошей освещенности помещения.

При использовании цоликлонов важно держать флаконы плотно зарытыми и не допускать пересыхания реагентов, иначе способность антител к активным действиям заметно снижается.

Перед процедурой подготавливается весь необходимый инвентарь.

Если лаборант проводит не только лабораторное исследование, но и забор крови, то необходимо подготовить одноразовые шприцы или вакуумные пробирки, жгут, медицинский спирт, ватные шарики и стерильные салфетки. Также под рукой должны быть инструменты для маркировки биообразов пациентов.

Проведения анализа

В современной лабораторной диагностике используется три вида стандартных цоликлонов для определения группы крови и резус фактора.

Реагент типа «Анти-А» окрашен в красный цвет, также окрашен и флакон, колпачок или этикетка флакона». Тип «Анти-В» окрашивается синим, а «Анти АВ» не помечается цветным маркером.

Производители реагентов выпускают упаковки с цоликлонами 5 или 10 мл. Не допускается использование испорченных или некачественных реагентов.

При наличии видимых дефектов упаковки или появлении хлопьев в жидкости, цоликлон не используют.

  • Для определения группы крови на специально подготовленную пластину, которая оформлена как таблица, наносят цоликлоны различных типов (А, В и АВ). Каждый из них должен быть подписан. Реагент наносится на специально отмеченную область. Каждый тип цоликлона должен наноситься отдельной стерильной пипеткой.
  • Рядом с реагентами помещается по 1 капле крови пациента.
  • Стерильной палочкой реагенты смешивают с биологическим образцом.
  • Уже спустя несколько секунд можно заметить изменения и происходящую реакцию агглютинации. По правилам наблюдение следует вести в течение 3 минут. После этого можно сделать вывод о результатах исследования.
  • Отсутствие какой-либо реакции склеивания во всех образцах означает, что в клетках эритроцитов пациента нет агглютиногена исследуемого типа. Образец крови причисляется к I группе (тип 0).
  • Если эритроцитарные клетки пациента вступили в реакцию с реагентами типа «Анти-а» и «Анти-АВ», то у пациента II группа крови (тип А).
  • Заметная агглютинация образца исследуемой крови с цоликлонами тип «Анти-АВ» и «Анти-В» означает, что пациент обладает III группой крови (тип В).
  • Если кровь пациента вступила в реакцию со всеми химичсекими реагентами, то исследуемый образец принадлежит к IV группе (тип АВ). При определении группы крови с помощью цоликлонов дополнительной проверки не требуется, так как реагенты не содержат добавок, которые могут спровоцировать спонтанную реакцию.

Определение группы крови и резус фактора проводится в лабораторных учреждениях в медицинских учреждениях.

Это достаточно простое исследование, которое дает очень полезную и жизненно важную информацию о человеке.

В будущем информация группы крови и резус фактора позволит быстро оказать помощь и организовать переливание крови после травмы или аварии и может спасти жизнь. Узнать свой номер ГК можно самостоятельно заказав исследование в любой медицинской лаборатории. Полученные данные необходимо внести в карту пациента.

Поделитесь с друзьями в соц.сетях

Приложение 3

УТВЕРЖДЕНОПриказ Минздрава Россииот 9 января 1998 года N 2

Введение

Под группами крови АВО подразумеваются различные сочетания антигенных свойств эритроцитов (агглютиногенов) и антител по отношению к ним (агглютиногенов), находящихся в плазме крови.

Существуют два групповых агглютиногена – А и В, и два агглютинина – альфа и бета. Различные сочетания этих свойств образуют четыре группы крови: Оальфа бета(I), Абета(II), Вальфа(III) и АВо(IV).

1. Определение группы крови при помощи стандартных изогемагглютинирующих сывороток. При этом способе в крови устанавливают наличие или отсутствие агглютиногенов и, исходя из этого, делают заключение о групповой принадлежности исследуемой крови.

2. Определение группы крови перекрестным способом, т.е. одновременно при помощи стандартных изогемагглютинирующих сывороток и стандартных эритроцитов. При этом способе, так же как и при первом, определяют наличие или отсутствие агглютиногенов и, кроме того, при помощи стандартных эритроцитов устанавливают наличие или отсутствие групповых агглютининов.

Группа крови у больных и других лиц, которым предполагается сделать переливание крови, определяется сертифицированным специалистом, имеющим специальную подготовку. Во избежание ошибки процедуру взятия крови и определения группы повторяют.

Результат определения группы крови записывается в правом верхнем углу лицевого листа истории болезни с указанием даты и за подписью специалиста, производившего определение.

Группа крови у доноров определяется два раза сертифицированным специалистом: один раз при первичном обращении донора при помощи стандартных сывороток двух различных серий каждой группы; и второй раз при окончательном зачислении в доноры – перекрестным способом, т.е. одновременно при помощи стандартных сывороток (также двух различных серий каждой группы) и стандартных эритроцитов.

Примечание: При использовании изогемагглютинирующих сывороток с титром не ниже, чем 1:64 разрешается проводить первичное определение группы крови у доноров и больных одной серией сыворотки каждой группы. При повторном и перекрестном определении можно использовать также сыворотки одной серии (с титром не ниже, чем 1:64), но отличающиеся от тех серий, которые были применены при первичном определении.

а. Стандартные изогемагглютинирующие сыворотки групп Оальфа бета(I), Абета(II), Вальфа(III) и стандартная сыворотка группы АВо(IV).

б. Стандартные эритроциты групп О(I), А(II) и В(III).*

—————-

* Стандартные эритроциты приготавливаются учреждениями службы крови в консервированном виде. Можно использовать и нативные свежие стандартные эритроциты, приготовленные малыми дозами в соответствии с действующей инструкцией по их изготовлению.

в. Изотонический раствор NaCl.

г. Белые фарфоровые или любые другие белые пластинки со смачиваемой поверхностью.

д. Пипетки.

е. Стеклянные или пластмассовые палочки для перемешивания капель крови и сыворотки.

а. Определение группы крови производят в помещении с хорошим освещением при температуре 15-25 град.С.

б. Ампулы, флаконы со стандартными сыворотками ставят в штатив с тремя гнездами (или в два штатива – при использовании двух серий сыворотки каждой группы). В левые гнезда ставят сыворотку группы Оальфа(I), в средние – сыворотку группы Абета(II) и в правые сыворотку группы Вальфа(III). В ампулы опускают сухие чистые пипетки.

в. Для определения группы крови перекрестным способом, кроме стандартных сывороток, подготавливают также стандартные эритроциты групп О(I), А(II) и В(III). Пробирки со стандартными эритроцитами устанавливают в маленький (на три гнезда) штатив в следующем порядке: слева – группы О(I), в середине – группы А(II) и справа группы В(III).

г. Для промывания стеклянных, пластмассовых палочек и пипеток подготавливают стаканы с водой и с изотоническим раствором NaCl.

а. На левой стороне пластинки надписывают Оальфа бета [анти-(А В)], в середине – Абета(анти-В) и справа – Вальфа(анти-А), на верхнем крае – фамилию и инициалы лица, у которого определяют группу крови.

Под соответствующим обозначением группы крови на пластинку наносят по одной большой капле (0,1 мл) стандартной сыворотки соответствующей группы. Если используют стандартные сыворотки двух различных серий каждой группы, всего получается 6 капель, которые образуют два ряда по три капли в следующем порядке слева направо: Оальфа бета-(анти-(А В), Абета(анти-В) и Вальфа(анти-А).

  1. Внесите в лунку планшета 50 – 100 мкл реагента.
  2. Добавьте 50 мкл 5 % взвеси эритроцитов в растворе NaCl.
  3. Перемешайте пипетированием.
  4. Инкубируйте при температуре 18 – 25 °С один час.
  5. Проведите визуальную оценку осадка эритроцитов на дне лунки. В случае положительного результата RhD-типирования агглютинаты с неровными четко очерченными краями равномерно выстилают дно. При отсутствии антигена D наблюдается осадок в виде точки.
  • На поверхность планшета наносится приблизительно 0,1 мл реагента.
  • Рядом капают 0,01 исследуемой крови.
  • Цоликлон и изучаемую жидкость смешивают специальной стеклянной палочкой, каждые полминуты планшет необходимо покачивать.
  1. Поместите каплю цоликлона «анти-Д» на тарелку или пластину.

  2. Капля цоликлона должна быть в 10 раз больше капли исследуемой крови /цоликлон – 0,1мл, кровь – 0,01мл/.

  3. Тщательно смешайте цоликлон с исследуемой кровью.

  4. Наблюдайте реакцию от 2-5мин. Положительный результат выражается в агглютинации эритроцитов. При отрицательном результате капли остаются равномерно окрашенными в красный цвет и агглютинация в них не наблюдается.

  1. Лунки планшета, в которых определяли группы крови, залейте 3% раствором хлорамина или другим дезинфицирующим средством, разрешенным для работы в вашей лаборатории, на 1 час.

  2. Через 1 час смойте дезинфицирующее средство проточной водой.

  3. Протрите планшету сухой ветошью.

  1. Подсчитайте количество капель крови на фильтровальной бумаге.

  2. Полученный результат умножьте на 30сек.

  3. Полученный результата сравните с нормой.

Приложение 1. ИНСТРУКЦИЯ по предупреждению несовместимости при переливании крови

Переливание или гемотрансфузия применяется по разным показаниям:

  • при кровопотере, когда нужно восстановить объём циркулирующей крови;
  • при необходимости замещения компонентов крови – лейкоцитов, эритроцитов, плазменных белков;
  • при нарушениях кроветворения;
  • при инфекционных заболеваниях;
  • при ожогах, тяжёлых интоксикациях, гнойно-воспалительных процессах и др.

Определение резус фактора цоликлонами

Идеальна для переливания, только собственная кровь человека. Если представляется возможным, то перед проведением операций с предполагаемой кровопотерей, заранее заготавливают кровь пациента. Берут её небольшими порциями с соблюдением определённых интервалов.

Для переливания донорской крови, используют одноимённую группу с тем же резус-фактором, что и у реципиента. Использование других групп, на сегодня запрещено.В некоторых случаях, при крайней необходимости, допускается использование для переливания кровь первой группы, с отрицательным резусом.

Переливание будет безопасно для реципиента, если у него отсутствуют антитела к антигенам донора.Поэтому, кровь 0 RH- подходит и может быть использована, для переливания любому реципиенту, так как в ней не присутствуют поверхностные антигены эритроцитов и резус-фактор.

И наоборот, людям с группой АВ RH , можно перелить кровь любой из групп, так как они не имеют антитела к антигенам остальных групп, и присутствует резус-фактор.При определении совместимости учитывается и возможность резус-конфликта: не допускается переливание от донора с положительным резусом, реципиентам с отрицательным резус-фактором.

Приложение 1

УТВЕРЖДЕНОПриказ Минздрава Россииот 09.01.98 N 2

I. Введение

1. Общие сведения

Основным принципом предупреждения гемотрансфузионных осложнений является обеспечение совместимости крови донора и реципиента.

Прежде чем приступить к переливанию крови, врач должен предусмотреть, чтобы кровь доноров была совместима с кровью реципиента.

Под совместимостью понимается благоприятное сочетание крови донора и реципиента. Биологически невозможное их сочетание по антигенам и антителам различных групповых систем определяет несовместимость крови донора и реципиента.

В настоящее время известно более 11 групповых систем крови человека, но значение их в переливании крови неравноценно. В первую очередь совместимость при переливании крови должна быть обеспечена правильным выбором донора по группам крови системы АВО и резус-антигену D.

Наибольшее значение для обеспечения совместимости при переливании крови имеет выбор крови по системе АВО.

Под группами крови АВО подразумеваются различные сочетания антигенных свойств эритроцитов, называемых агглютиногенами, и антител по отношению к ним – агглютининов, находящихся в плазме крови людей.

Агглютинин альфа (альфа) является антителом по отношению к агглютиногену А, а агллютинин бета (бета) является антителом по отношению к агглютиногену В. Ошибочное переливание иногруппной крови, содержащей агглютиногены, против которых у больного имеются антитела, т.е. крови, содержащей агглютиноген А, при наличии у реципиента агллютининов альфа (анти-А), или крови, содержащей агглютиноген В, при наличии у реципиента агглютинина бета (анти-В), приводит к явлению несовместимости.

Кроме антигенов системы АВО, в эритроцитах людей имеется множество других антигенов, образующих различные групповые системы. независимые как от системы АВО, так и друг от друга. Наиболее важное значение при переливании крови, после групп крови АВО, имеют антигены системы резус D, С, Е, с, е, C_W, особенно, обладающий наибольшей активностью, антиген D, называемый резус-фактором.

Эти антигены, находясь в эритроцитах людей в различных сочетаниях, образуют 28 фенотипов (см. “Инструкцию по определению резус-принадлежности крови”). Так же как и антиген D, любой другой фактор этой системы может вызвать образование изоиммунных антител у лиц, его не имеющих, однако значительно реже и, большей частью, лишь как сопутствующих антителам против антигена D.

Главным отличием системы резус от системы АВО является то, что в крови людей содержатся только агглютиногены этой системы, а антител по отношению к ним, подобных антителам альфа и бета системы АВО, обычно, в норме у людей не имеется. Однако, у резус-отрицательных лиц при некоторых условиях (при переливании или при другом способе введения резус-положительной крови или во время беременности женщины резус-положительным плодом) может произойти сенсибилизация, т.е. могут образоваться изоиммунные антитела антирезус.

Последствием этой сенсибилизации у беременной женщины является рождение детей с гемолитической болезнью или внутриутробная смерть плода. Поэтому наличие у женщин такого анамнеза, так же как сведения о трансфузионных реакциях, как у женщин, так и у мужчин, уже указывают на возможное наличие у них резус-антител.

Если больному, в крови которого имеются резус-антитела, ошибочно перелить резус-положительную кровь, то это приведет к явлению несовместимости. Лиц, в крови которых содержится резус-антиген D, т.е. резус положительных (Rh ), около 85 %. 15% людей являются резус-отрицательными (rh-). (Вычислено среди лиц русской национальности).

Антигены других групповых систем также обладают активностью, в первую очередь Келл (К), Даффи (F_у), Кидд (Jk), затем антигены системы MNSs и другие. Однако, антигенная активность их значительно ниже и антитела по отношению к ним встречаются редко. Антитела ко всем этим антигенам могут образоваться у человека любой группы системы АВО, а также, кроме антител анти-D, независимо от резус-принадлежности, т.е.

Если реципиенту, в крови которого имеются антитела, перелить кровь донора, эритроциты которого содержат антигены, против которых направлены эти антитела, такая кровь будет разрушаться в организме реципиента, т.е. она является для него несовместимой. Перед переливанием крови врач должен убедиться в том, что предназначенная для переливания кровь не содержит антигенов, против которых в крови больного имеются антитела, т.е.

совместима с кровью реципиента. Для того, чтобы не допустить переливания несовместимой крови и следующих за этим клинических проявлений несовместимости, врач, переливающий кровь, обязан: – правильно выбрать кровь в отношении групп крови системы АВО; – правильно выбрать кровь в отношении резус-принадлежности;- проверить всю относящуюся к этому документацию;

С, Е, с, е, С_W, К, F_у, Jk, М, N, S, s и др. Предупреждению несовместимости по отношению к этим антигенам, так же как и в отношении антигена D, должно, в первую очередь, служить тщательное выявление трансфузионного и акушерского анамнеза. Кроме того, несовместимость к некоторым из них может быть установлена при проведении проб на совместимость.

Вопросы совместимости в отношении групп системы АВО решаются различно в зависимости от того, переливается ли цельная кровь или предполагается использовать эритроциты, освобожденные от плазмы (отмытые, размороженные).

а) при переливании цельной крови она должна быть одноименной по группам АВО. т.е. реципиенту может переливаться кровь той же группы, к которой принадлежит он сам. При переливании цельной крови детям это правило является обязательным. При переливании крови взрослым реципиентам в исключительных случаях допускается переливание крови группы 0(I) реципиентам другой группы, однако количество переливаемой крови в этих случаях должно быть ограничено.

Эти ограничения связаны с тем, что групповые антитела у доноров группы 0(I), особенно агглютинины альфа (анти-А), иногда носят иммунный характер, бывают очень активными и поэтому могут вызывать разрушение эритроцитов крови реципиента другой группы;

б) при использовании эритроцитов, освобожденных от плазмы (отмытых, размороженных), эритроциты группы 0(I) являются как бы универсальной трансфузионной средой и могут быть перелиты реципиенту любой группы. Реципиенты группы АВ(IV), в крови которых не содержится групповых антител, являются как бы универсальными реципиентами и им могут быть перелиты эритроциты любой группы крови, освобожденные от плазмы.

Кровьодноименной    Оальфа бета(I)  Абета(II)   Вальфа(III)  АВо(IV)совместимойгруппы ————– ——— ———– ——- Реципиент    ¦Оальфа бета(I)¦ ¦Абета(II)¦ ¦Вальфа(III)¦¦АВо(IV)¦ ————– ——— ———– ——-

Кровьне одноименной,но совместимойгруппы            Оальфа бета(I)  Абета(II)   Вальфа(III)  АВо(IV)(переливается висключительныхслучаях)

Полезные советы

Определение группы и резус-фактора крови с использованием цоликлонов считается одним из самых простых и доступных методов, поэтому широко применяется в лабораториях разного уровня. Кроме того, такой анализ дает достоверные результаты. Однако в некоторых случаях они бывают ложными, а причиной этому становится несоблюдение нескольких правил.

  • хранить реагенты в холодильнике, при температуре от 2 до 8 градусов, а распечатанный флакон использовать в течение 30 суток;
  • исследования проводятся при комнатной температуре, а в слишком жарком помещении рекомендуется периодически охлаждать стеклянную поверхность планшета;
  • обозначать на планшете разные цоликлоны маркером, поскольку их цвет после добавления крови быстро исчезает;
  • соблюдать правильные пропорции реагентов: если крови будет слишком много, реакция агглютинации эритроцитов будет мало выражена;
  • не допускать смешивания капель жидкости, в которых уже присутствуют разные типы цолкиклонов — в таком случае реакцию придется проводить заново;
  • обозначать окончательный результат не менее, чем через 3 минуты после начала реакции.

Важно также соблюдать последовательность действий во время анализа. Так, если стеклянную поверхность не раскачивать, даже при отсутствии реакции склеивания эритроциты будут расположены в краевой зоне капли

Это может стать причиной неправильной интерпретации результатов. При определении группы крови необходимо учитывать острые и хронические заболевания, которые наблюдаются у пациента. При патологиях печени и органов кроветворной системы, а также болезнях, которые протекают по типу сепсиса, может происходить явление патагглютинации.

Цоликлоны — это важные реагенты, которые используются ежедневно в гематологических лабораториях. Они позволяют быстро и безошибочно определить группу крови и ее резус без дополнительного оборудования и специальных навыков

Однако важно выполнять простой алгоритм, чтобы результаты анализа действительно были достоверными

Реакция со стандартными эритроцитами

В кабинете должна отсутствовать пыль, мухи, насекомые, которые могут помешать выполнению теста. Помещение должно быть хорошо освещено. Флакон с цоликлонами должен быть плотно закрыт, чтобы реагенты не пересохли, в противном случае достоверность анализа снизится. Для определения группы крови и резуса при помощи цоликлонов нужна специальная подготовка. В лабораторном кабинете температура воздуха может быть 15… 25ºC, в этом случае результат будет точным.

Перед анализом подготавливают нужные медицинские инструменты:

  • пробирку;
  • планшет, на который наносят реагент;
  • пипетки;
  • палочки для изъятия лабораторных образцов.

Если медицинский работник не только выполняет исследования, но и берет анализ у пациента, то надо подготовить:

  • жгут;
  • спирт для медицинской обработки;
  • одноразовый шприц;
  • пробирки;
  • ватный тампон;
  • салфетки;
  • специальный лабораторный маркер.

Алгоритм определения группы крови цоликлонами состоит в следующем. Лабораторное тестирование осуществляется при помощи 3 видов этих веществ:

  • «Анти-A» красного цвета, такой же оттенок имеет бутыль, крышка и этикетка препарата.
  • «Анти-B» имеет синий цвет, а также крышку, бутыль и этикетку, окрашенные в синий тон.
  • «Анти-D» — бесцветный и находится в прозрачной бутылке.

При определении резус-фактора цоликлонами нельзя применять некачественные реагенты. Если флакон имеет дефекты или внутри жидкости есть осадок, то реагент потеряет свое действие. Чтобы определить группу, медицинский работник наносит цоликлоны на лабораторную пластину, выполненную в виде таблицы. Наносятся реагенты разных типов (A, B и D). Каждый образец подписывается. Цоликлон наносят на отмеченный участок. Каждый вид реагента берут своей пипеткой.

Рядом с сывороткой капают по 1 капле крови человека, затем чистой палочкой ее размешивают с реагентами. Через несколько секунд начнется реакция. Лаборант проводит наблюдение за реагентами 3 минуты. Потом можно расшифровывать результат анализа.

Техника определения.

— 1мл стандартного универсального реагента (антирезусная сыворотка группы AB(IV) 33% раствор полиглюкина);

-1мл исследуемой крови(эритроцитов)

На дно пробирки внести 1 каплю стандартного универсального реагента и 1 каплю исследуемой крови (или эритроцитов).

Содержимое пробирки перемешать встряхиванием и затем медленно поворачивать, наклоняя пробирку почти до горизонтали таким образом, чтобы содержимое растекалось по её стенкам. после 3-минутного покачивания ,

для исключения неспецифической агрегации эритроцитов в пробирку добавить 2-3мл физиологического раствора хлористого натрия и перемешать, не взбалтывая, путём 2-3-х кратного перевёртывания пробирки. Оценку производить визуально.

Оценка результата.

Резус-( ) -наличие агглютинации в виде крупных хлопьев из эритроцитов на фоне просветлённой жидкости .

Резус-(-) -отсутствие агглютинации (в пробирке гомогенно окрашенная жидкость).

Определение резус-фактора с помощью моноклонального реагента (цоликлон анти-d , анти-d супер).

Цоликлон анти-D супер выпускается во флаконах по 2,5 или 10 мл (1 мл содержит 10 доз). Срок хранения — 1 год в холодильнике при t 2~8 °С. Вскрытый флакон можно хранить в холодильнике в течение месяца в закрытом виде

Наносят большую каплю (около 0,1 мл) реагента на пластинку или планшет.

Рядом помещают маленькую каплю (0,01-0,05 мл) исследуемой крови и смешивают кровь с реагентом.

Реакция агглютинации начинает развиваться через 10-15 сек, четко выраженная агглютинация наступает через 30-60 сек.

Результаты реакции считывают через 3 мин.

Тарелку после смешивания реагента с кровью рекомендуется покачивать не сразу, а через 20-30 сек, что позволяет за это время развиться более полной крупнолепестковой агглютинации.

Метод агглютинации на чашках Петри.

— исследуемые эритроциты;

-две серии стандартных сывороток антирезус всех групп системы АВО;

-водяная баня с постоянной температурой 46-48 С°

-чашки Петри

Наличие агглютинации свидетельствует о положительном результате, отсутствие ее — об отрицательном. Для контроля в этом методе используют заведомо Rh-отрицательные и Rh-положительные эритроциты.

Реакция конглютинации с желатиной обычно проводится в пробирках емкостью 8—10 мл. В штатив устанавливают 2 ряда пробирок для двух различных серий стандартной сыворотки. В контрольные пробирки каждого ряда вводят по 1 капле стандартных резус-положительных и резус-отрицательных эритроцитов, в остальные пары пробирок — исследуемые эритроциты. Исследование можно проводить как с отмытыми, так и с неотмытыми эритроцитами.

Затем в каждую пробирку добавляют по одной капле подогретой до разжижения желатины (10% раствор) и по одной капле стандартной сыворотки. Содержимое пробирок смешивают путем встряхивания и помещают в водяную баню при t° 46—48° на 5 мин., по истечении которых в каждую пробирку доливают 5—8 мл подогретого до t° 46—48° физиологического раствора NaCl и рассматривают на свет, определяя наличие или отсутствие агглютинации (рис. 2).

Метод агглютинации в солевой среде.

При исследовании сывороткой, содержащей полные антитела, применяют метод агглютинации в солевой среде в маленьких пробирках (высотой 2—2,5 см, диаметром 0,5 — 0,6 см).

В штатив устанавливают 2 ряда пробирок (по количеству исследуемых образцов и по 2 для контроля), в которые вводится по 2 капли стандартной сыворотки и по 1 капле 2% взвеси эритроцитов, предварительно дважды отмытых физиологическим раствором NaCl.

Содержимое пробирок встряхивают и помещают в термостат при t° 37° на 1 час.

О резус-принадлежности судят по форме осадка, который рассматривают через лупу с 5—7-кратным увеличением над источником света, закрытым матовым стеклом. Результаты учитывают в зависимости от наличия или отсутствия агглютинации в исследуемых эритроцитах после проверки контрольных образцов.

Для проведения процедуры необходима хорошо освещенная лаборатория. Помещение должно быть защищено от насекомых, пыли, грязи, волос. Надо поддерживать температуру в пределах 15 25. Внимательно следят за влажностью. О необходимой влажности можно прочитать в инструкции на упаковке цоликлонов. В таких условиях анализ получится более достоверным. Обязательно наличие чистой медицинской одежды, специальных перчаток и головного убора.

Применяемые инструменты, чтобы определить группу крови:

  • цоликлоны антиА и антиВ;
  • материал для исследования;
  • планшет для анализа;
  • стеклянные палочки (стерильные);
  • раствор натрия хлорида;
  • пипетка, стерильная;
  • посуда или миска с раствором хлорамина 3%;

Расшифровка и забор анализа проводится в лаборатории. Для определения группы крови алгоритм действий следующий. Надо налить цоликлоны по 1 капле в отсеки на планшете. Внести пипеткой капли крови рядом, избегая контакта пипетки и образца. Стеклянными палочками перемешать цоликлоны и кровь. Смешивать субстанции надо покачивая из стороны в сторону, аккуратно. Наблюдать реакцию можно через 2,5 минуты.

Далее вносят пипеткой в отсеки, где произошла агглютинация по 1 капле раствора натрия. Смешивают также, покачивая. После чего наблюдают изменения.

  1. Технические ошибки

• неправильная маркировка пробирок с кровью, взятой на исследование (перепутывание пробирок от разных индивидов);

• ошибочный порядок нанесения агглютинирующих сывороток и цоликлонов на пластинку, неправильная регистрация результатов исследования;

• нарушение техники исследования: неправильное соотношение сыворотки и исследуемых эритроцитов; использование сывороток с истекшим сроком годности; сокращение времени наблюдения за реакцией; проведение исследования при температуре окружающей среды выше 25°С, что может приводить к ложноотрицательной реакции.

  1. Ошибки, обусловленные недостаточно высоким качеством реактивов, применяемых для определения групп крови.
  1. Ошибки, обусловленные индивидуальными особенностями антигенов эритроцитов АВО.
  1. Включить прибор в сеть, нажать на тумблер, дать прогреться в течение 10 минут
  2. Нажать клавишу «абс» = «1»
  3. После появления надписи «выбрать фильтр» нажать одну из клавиш (от1 до 6), обозначающую нужный фильтр и нажать клавишу «ввод»
  1. После появления надписи «выбр. диф. фильтр» нажать клавишу «нет» = 0
  2. После появления надписи «дифф. режим выкл.» нажать клавишу «ввод»
  3. После появления надписи «измерен. бланка» вставить в измерительную камеру пробирку-кювету «холостая проба» = «бланк». На дисплее появится результат абсорбции (экстинкции), достать пробирку–кювету «бланк» из измерительной камеры и поставить её в штатив или в термостат прибора
  4. После появления на дисплее надписи «измерение пробы» вставить в измерительную камеру пробирку-кювету «стандартная проба», на дисплее появляется результат абсорбции (экстинкции) стандартной пробы, записать результат в тетрадь, достать пробирку –кювету с «стандартная проба» из измерительной камеры, поставить её в штатив или в термостат прибора
  5. После повторного появления на дисплее надписи «измерение пробы» вставить в измерительную камеру пробирку-кювету «опытная проба», на дисплее появляется результат абсорбции (экстинкции) опытной пробы, записать результат в тетрадь, достать пробирку –кювету «опытная проба» из измерительной камеры, поставить её в штатив или в термостат прибора
  6. Нажать на клавишу «сброс» дважды, что означает выход из режима.
  7. Нажать на тумблер, выключить прибор, вынуть вилку из розетки.
  8. Рассчитать концентрацию определяемого аналита по формуле:

Сопыта = Еопыта/Естандарта х Сстандарта

  1. Счетная камера должна быть абсолютно чистой и сухой.
  2. Притрите покровное стекло к камере Фукс-Розенталя до радужных колец Ньютона.
  3. Тщательно перемешайте жидкость в пробирке, чтобы взвесь форменных элементов была равномерной.
  4. Заполните камеру при помощи стеклянной палочки или пастеровской пипетки.
  5. После заполнения камеры оставьте ее на 1-2мин на предметном столике микроскопа, чтобы элементы осадка осели на дно и движение их прекратилось (при заполнении камеры жидкость не должна попадать в борозды камеры и в ней не должно быть пузырьков воздуха).

1. Тщательно перемешайте утреннюю порцию мочи и 10 мл поместите в центрифужную пробирку.

2. Центрифугируйте 5 мин при 2000 об/мин.

Техника определения групп с помощью цоликлонов

Реагенты необходимо хранить плотно закрытыми, так как при высыхании значительно снижается активность антител.

Нельзя использовать содержащие хлопья и мутные реагенты. Для каждого из реагентов требуется отдельная пипетка.

Анализ проводится на белой тарелке или планшете с хорошо смачиваемой поверхностью. Благодаря высокой активности и авидности цоликлонов, есть возможно применение по серии реагентов анти-A и анти-B.

На планшете нужно сделать надписи с названиям антигенов анти-A/анти-B. Далее снизу от соответствующих надписей капают примерно 0,1 миллилитр цоликлонов. У реагента анти-A цвет желтовато-розовый, у анти-B – синий.

Определение групп крови

Возле моноклональных антител капают по одной капле крови, смешивают ее уголком предметного стекла или стеклянной палочкой с реагентами. Перед дальнейшим смешиванием пар капель необходимо тщательно промыть и насухо вытереть стекло или палочку.

Наблюдение за процессом агглютинацией ведут в течение 2,5 минут, при этом тарелку или планшет нужно слегка покачивать. По истечении времени оценивают результат. Стоит отметить, что наблюдения за агглютинацией не требуют каких-либо специальных приспособлений.

Агглютинаты достаточно хорошо видны даже невооруженным глазом, быстро сливаясь и образуя большие хлопья. В случае, если не происходит склеивания, капля реагента приобретает равномерную окраску красного цвета.

Помните о том, что ни один врач не будет совершать инфузию крови без знания ее группы и резуса. Данная процедура может понадобиться в случае, если произошло ДТП, травма или еще какой – то неприятный случай, сопровождающийся повреждением целостности кожных покровов и, вследствие чего произойдет кровотечение.

Очень важно в такие моменты немедленно начать переливание, так как каждая минута здесь на вес золота. Чем скорее начнется процедура, тем вероятнее, что она пройдет без дальнейших осложнений для здоровья человека. Это касается неотложных случаев, но существуют и такие моменты, когда знание группы необходимо не срочно.

Это такие ситуации как: планирование проведения оперативного вмешательства, если вы хотите стать донором крови для кого – то, при наступлении беременности, для постановки на военный учет, при планировании беременности, для определения отцовства.

Во всех этих случаях, а также если вы хотите удовлетворить собственное любопытство необходимо сдавать кровь на определение ее группы и резуса.

Существует несколько методов, с помощью которых можно узнать эту информацию. Это определение группы с помощью сывороток или при помощи использования цоликлонов.

Последний метод является наиболее популярным, так как имеет несколько преимуществ, именно его мы и рассмотрим.

Что это за метод?

Прежде всего необходимо разобраться, что же представляет собой метод определения группы крови при помощи цоликлонов. И здесь мы сразу же сталкиваемся с новым словом, которое, скорее всего, ранее не слышали.

Цоликлоны, что это такое? Это специальный раствор антител, который связывается на поверхности эритроцитов с антигенами. Таким образом, происходит биохимическая реакция, в ходе которой врачи могут узнавать всю необходимую информацию по поводу группы крови или резус-фактора пациента.

Преимущество метода с цоликлонами в том, что в отличии от такового с сыворотками, с его помощью можно сразу же узнать и резус-фактор.

Стоит сразу отметить, что существует несколько разновидностей цоликлонов:

  • анти – А (представлен красной жидкостью),
  • анти – В (синяя жидкость),
  • анти – D (прозрачная жидкость).

Первые два цоликлона необходимы для определения группы крови. А вот третий, представленный в этом списке помогает определиться с резус-фактором. Данные разновидности цоликлонов выпускаются в небольших прозрачных флаконах, объем которых составляет 5 или 10 миллилитров.

Хранить его можно на протяжении двух лет в темном, недоступном для детей месте. Приобрести такой флакончик можно практически в любой аптеке, при необходимости можно заказать его на складе.

Помните о том, что при определении группы крови и резус – фактора ни в коем случае нельзя смешивать данные цоликлоны. Брать их необходимо разными пипетками, обычно каждый из них продается с отдельной пипеткой. В случае, если вы смешаете цоликлоны, то группа крови будет определена неправильно и вам нужно будет еще раз повторить процедуру.

Для того, чтобы узнать группу крови, необходимо прежде всего подготовить все необходимое для этого. Поэтому вам понадобится:

  • специальный планшет с семью небольшими лунками,
  • три цоликлона: анти – А, анти – В и анти – D,
  • три пипетки,
  • изотонический раствор натрий хлора,
  • шприц для забора крови,
  • спирт,
  • вата,
  • жгут.
  1. Начинать процедуру необходимо с забора крови. Обычно используют кровь, взятую из вены. Но в некоторых случаях применяют кровь из пальца. Набрав небольшое количество крови можно приступать к проведению самой процедуры.
  2. Проследите за тем, чтобы температура воздуха в помещении, где будет проводиться процедура была не более 25 С. Начинать необходимо с нанесения по одной небольшой капле цоликлонов в лунки планшета.
  3. В первую лунку капнуть цоликлон анти – А, во вторую анти – В и в ту, которая располагается сбоку поместить анти – D. Обратите внимание, что каждый вид цоликлона нужно наносить разными пипетками, чтобы они не имели возможности смешаться. В противном случае результаты нельзя считать достоверными и процедуру необходимо будет делать заново.
  4. После этого необходимо добавить по одной капле крови к каждому цоликлону и аккуратно смешать две эти жидкости.
  5. После этого нужно аккуратно раскачивать планшет на протяжении 3 минут.
  6. Результаты можно будет наблюдать уже после 10 – 15 секунд, но для более достоверного результата необходимо подождать 3 минуты. Предварительные результаты можно определять по истечению этого времени. Однако после этого необходимо в каждую лунку добавить по одной капле изотонического раствора хлорида натрия и смешать жидкости.
  7. После этого нужно на протяжении 3 – 5 минут раскачивать планшетку и уже затем окончательно определять группу и резус – фактор.

Определение резус фактора цоликлонами

При определении группы крови и резус-фактора вы сразу же обратите внимание на то, что под тремя ленками, которыми вы будете пользоваться находится еще три таких же. Они необходимы для повторного определения, если оно может понадобиться.

Существует всего 4 группы крови:

  • I (0),
  • II (А),
  • III (В),
  • IV (АВ).

После того, как вы смешаете цоликлоны с каплями крови и подождете около трех минут, вам необходимо будет приступать к определению результата.

О том, какая группа крови в данном определенном случае будет свидетельствовать произошедшая реакция агглютинации. Это значит, что в определенной лунке эритроциты стали похожими на зернышки небольших размеров.

А при добавлении в них изотонического раствора натрий хлора они не изменили свой начальный вид.

Для определения резус – фактора необходимо выполнить практически те же действия, что и при определении группы крови.

  1. Для этого необходимо добавить в третью лунку, находящуюся на планшете одну большую каплю цоликлона анти – Д и каплю.
  2. Сюда сразу же добавить каплю крови, которая будет немного поменьше. Также само покачать планшет на протяжении трех минут и приступать к определению результатов.
  3. После этого необходимо добавить в лунку каплю изотонического раствора натрий хлора и раскачивать планшетку на протяжении еще 5 минут.
  4. После этого можно приступать к окончательному определению резус – фактора.

Стоит отметить, что существует два вида резус – фактора. Положительный и отрицательный, с помощью цоликлонов вы сможете определить, какой именно у вас.

Цель:определить совместимость донорской крови с кровью реципиента по резус принадлежности.

Показания:гемотрансфузия.

Приготовить:донорская кровь, 33% раствора полиглюкина, сыворотка крови реципиента, стеклянные палочки, пипетки, чашка Петри, шприц, игла, стерильные марлевые шарики, спирт, стерильный пинцет, стерильные перчатки, песочные часы, водяная баня.

Алгоритм действия:

  1. На дно пробирки внести 2 капли сыворотки больного, 1 каплю крови донора и 1 каплю 33% полиглюкина;
  2. Встряхнуть пробирку;
  3. Пробирку наклонить почти горизонтально и медленно поворачивать вокруг оси в течении 5 минут;
  4. Долить в пробирку 3-4 мл изотонического раствора хлорида натрия;
  5. Перемешать путем 2-3 кратного переворачивания пробирки ( не взбалтывать!);
  6. Посмотреть на свет и оценить результат;
  7. Если есть реакция агглютинации на фоне просветленной жидкости, то кровь переливать нельзя!;
  8. Если агглютинации не произошла, то реакция отрицательная и кровь переливать можно.

Примечание: температура воздуха должна быть в пределах 15- 25о С для профилактики ложной агглютинации.

Техника постановки биологической пробы

Цель: для определения совместимости крови донора и реципиента.

Приготовить:донорская кровь, систему для переливания крови, стерильные марлевые шарики, спирт, стерильный пинцет, стерильные перчатки.

Алгоритм действия:

  1. Перелить струйно 10-15 мл крови или кровезаменителей внутривенно;
  2. Закрыть систему на 3 минуты;
  3. Оценить состояние пациента;
  4. Перелить струйно 10-15 мл крови или кровезаменителей внутривенно;
  5. Закрыть систему на 3 минуты;
  6. Оценить состояние пациента;
  7. Перелить струйно 10-15 мл крови или кровезаменителей внутривенно;
  8. Оценить состояние пациента.

Примечание:При появлении болей в животе, груди, пояснице, рвоте, головной боли, одышке, тахикардии, сыпи на коже – кровь или кровезаменители вводить нельзя!

Увидеть результат при появлении хлопьев эритроцитов можно без использования специального лабораторного оборудования

При склеивании и выпадении осадка из эритроцитов кровь считается резус-положительной, а при отсутствии агглютинации резус-фактор получает отрицательную отметку. Увидеть результат при появлении хлопьев эритроцитов можно без использования специального лабораторного оборудования.

Важно! Возникновение агглютинации отмечается спустя 15 секунд после перемешивания, ярко заметный эффект наступает через 60 секунд, однако результат, который допустимо считать достоверным, наблюдается только через 3 минуты. В течение всего времени планшет нужно покачивать.

Оценка результата.

-чашки Петри

Практически сразу после рождения у ребенка берется анализ крови на группу крови и резус-фактор. Эти данные остаются неизменными на всю жизнь. Однако не всегда родители запоминают группу крови и резус малыша.

  • Определение группы крови и резус-фактора
  • Алгоритм действий при определении группы крови и резус-фактора при поступлении женщины в родильный дом
  • Определение группы крови системы АВ0 моноклональными антителами
  • Подготовить:
  • сухое предметное стекло (типовую тарелочку) для определения группы крови;
  • цоликлоны анти-А (розового цвета) и анти-В (синего цвета);
  • две пипетки для взятия цоликлонов из флаконов;
  • две стеклянные палочки для смешивания крови пациентки с цоликлонами;
  • одноразовый шприц (на 5-10 мл) с иглой для взятия крови из вены пациентки;
  • в стерильный лоток положить 3 шарика, смоченных спиртом, 2-3 стерильные салфетки;
  • резиновый жгут для внутривенных пункций;
  • сухую центрифужную пробирку, на которой стеклографом отчетливо подписать фамилию пациентки;
  • бланк – направление в лабораторию, где врачом – лаборантом повторно определяется группа крови, резус принадлежность, ставится печать и подпись

Плюсы и минусы методов

Определяют группу с помощью изогемагглютинирующих средств — лабораторных реагентов. Исследование проводится, когда смешивают реагент с нативной кровью, и при добавлении раствора натрия хлорида (0,9%).

В процессе исследования изучается, какие антитела (антигены) имеются у натива, а какие отсутствуют. Таким образом и определяется, какая кровь — 0, А, В или АВ.

В каждой группе свой набор агглютиногенов (антигенов) и агглютининов (антител):

  • 1 (или нулевая) — на поверхности красных кровяных телец присутствует антитело A и антитело B. При этом полностью отсутствуют антитела в сыворотке. Поэтому реакции агглютинации не происходит.
  • 2 — есть в крови агглютинин B (антитело), агглютиноген (антиген) А.
  • 3 — наличествует антиген В и антитело A.
  • 4 — присутствуют оба белка (2 антитела), и нет ни одного антигена. Она является наименее распространенной — около 8% населения.

Определение группы крови по стандартным сывороткам необходимо для того, чтобы при переливании агглютинация ни привела к летальному исходу того, кто подвергся гемотрансфузии. Реакция агглютинации, т. е. склеивания, происходит тогда, когда при попадании сыворотки на эритроциты натива начинается процесс уничтожения этих телец.

Склеиваться клетки будут при взаимодействии антигена А и антитела A. И при взаимодействии антигена В и антитела B. При агглютинизации в пробе всегда появляются хлопья — склеенные между собой красные клетки.

К минусам можно отнести неточность, при получении сведений. Это происходит при допущении ошибок, которые могут испортить результат:

  • отсутствие специальной одежды, перчаток;
  • не стерильность палочек, оборудования;
  • малое время ожидания;
  • отсутствие физраствора в отсеках.

Плюсом методики считают достоверность. Метод точен на более чем 95%. Простота проведения – смешивание компонентов, требует минимум знаний и оборудования. Еще одно преимущество — доступность всех ингредиентов. Способ позволяет быстро определить группу и резус-фактор. Время агглютинации составляет всего 2,5 минуты. И столько же длится определение и запись результата.

Материал для проведения исследования подходит любой. Это может быть венозная кровь или из пальца. По времени и типу хранения — законсервированная, замороженная или взята в момент самого анализа.

Если говорить о каждом конкретном методе проверки группы крови, то можно выявить следующее:

  • Плюс перекрёстного метода в его контрольной направленности, то есть он имеет особенность предотвращать главные ошибки при диагностировании группы крови другими стандартными способами;
  • Плюс способа с применением цоликлонов заключается в его возможности применения в случаях, когда стандартные сыворотки не могут быть применены. Минус же заключается в сложности проведения, соблюдении всех условий для оптимального проведения процедуры;
  • Эритротесты хороши тем, что доступны и для домашнего использования, но отрицательной их стороной считается неидеальная результативность, то есть итог может быть некорректным.

Перечисленные методики в общей характеристике в равной степени обладают теми или иными положительными и отрицательными сторонами.

Среди них можно выделить минусы:

  • Возможность ошибки – даже при проведении сложной и оправданной методики могут появляться ошибочные результаты.
  • Обязательное соблюдение правил – многие методики должны проводиться в специальных условиях, требующих тщательной подготовки и соблюдения определённых параметров помещения, его температуры и влажности. Реагенты должны корректно храниться, что тоже накладывает свои трудности на практику проведения исследования.

Среди плюсов выделяют:

  • Многие из данных методик точны, позволяют получить правильный результат с точностью до 100% (особенно это касается способа с применением цоликлонов).
  • Быстрота выполнения – для проведения анализа и ожидания времени воздействия реагентов на кровь не уходит много времени, обычно продолжительность реакции составляет не более 5-ти минут.
  • Возможность определения родства при анализе крови на принадлежность к группе.
  1. Кровь для исследования берут из вены в пробирку, центрифугируют или оставляют на 30 мин для получения сыворотки.
  2. На маркированную тарелку наносят три больших капли (0,1 мл) сыворотки крови из пробирки, а рядом с ними по одной маленькой капле (0,01 мл) стандартных эритроцитов групп.
  3. Соответствующие капли смешивают стеклянными палочками, планшет покачивают, наблюдают в течение 5 мин, в капли с агглютинацией добавляют NaCl 0,9% и оценивают результат.

Практически каждый человек хотя бы единожды за свою жизнь проходил тест для установления принадлежности группы крови. О методах проведения данного анализа и об их достоверности пойдет речь далее.

Для чего проводится диагностика?

Группа крови – это определенный ряд антигенов, размещенных на поверхности эритроцитов, которые и определяют их специфичность. Таких антигенов известно очень много, поэтому принято единую классификацию крови по АВО и резус-фактору.

Этот показатель в обязательном порядке определяется у пациентов перед хирургической операцией, военным, полицейским и другим категориям людей, которые могут потребовать срочного переливания крови.

Самый распространенный метод исследования данного показателя – это способ с применением стандартной сыворотки. Эта диагностика определяет общепринятые антигены по системе АВО.

Изогеммагглютинирующая сыворотка представляет собой совокупность специальных антител к наружным частичкам эритроцитов.

Если находится совместимый антиген, на который могут воздействовать антитела, то формируется комплекс, способствующий началу иммунно-защитного механизма.

Вследствие этого происходит склеивание эритроцитарных клеток крови (агглютинация). Если подобное происходит, то делается вывод о несовместимости крови.

Данные сыворотки изготавливаются из крови доноров по специальной системе, подразумевающая под собой извлечение плазмы, в которой и содержать антитела, после чего ее разводят изотоником – хлорид натрия, это проходит в несколько этапов:

  • В емкость наливают 1 мл воды, в которой растворено 0,9% обычной соли.
  • В эту же пробирку вносят такое же количество разведенной плазмы.
  • Затем 1 мл данной жидкости вносят в емкость с изотоником.

Процесс позволяет получить соотношение 1:256. Если методика разведения будет нарушена, то есть большая вероятность получения ошибочных результатов.

На поверхность планшета наносится 0,1 мл каждой сыворотки в район, где нанесена нужная пометка. За тем берется исследуемая кровь объемом 0,01 мл для каждого образца. И затем проводится смешивание каждой капли сыворотки с кровью.

Спустя пять минут проводят диагностику. Тестирование считается положительным, если прошла реакция агглютинации. Исходя из результатов анализов, выполняется построение таблицы, в которую они и заносятся.

  • Таблица результатов теста на группу крови с применением стандартных сывороток.
  • Методика перекрестных реакций

В этом случае, чтобы определить агглютиноген используют цоликлоны. Иначе стандартные сыворотки с технологией параллельного выяснения благодаря эталонным эритроцитарным клеткам.

Два этих способа весьма сходны между собой. Но различия все, же есть.

На поверхность, на которую предварительно помещаются различные сыворотки, наносят по небольшой капле обычных эритроцитов. Затем кровь разделяют на фракции при помощи центрифуги. И форменные элементы добавляют к стандартным сывороткам, а плазменную часть – к стандартным эритроцитарным клеткам. Оценивание результатов проводят через пять минут и показатели отмечают в таблице.

Благодаря данной методике исключаются ошибки при исследовании.

  1. Если нет возможности определить группу крови стандартными сыворотками, то используют данную методику.
  2. Цоликлоны – гибридные антитела, которые получают из в-лимфоцитов крови мышей.
  3. Последовательность проведения диагностики такая:
  1. После нанесения отметок на планшет, которые соответствуют виду цоликлона, наносится раствор.
  2. К каждому образцу цоликлона вносят одну каплю диагностированной крови.
  3. Оценка результатов через пять минут.
  4. Для данной методики необходимо соблюдать специальные условия. Они включают в себя пригодность цоликлонов, температуру в помещении и уровень влажности.

Результаты анализов считаются позитивными в том случае, когда при смешивании данных фракций наблюдается реакция агглютинации. Если подобное произошло в двух образцах, то считается, что кровь относится к четвертой группе. Если реакция не наблюдается вовсе, то к первой. Диагностические ошибки в данной методике встречаются не часто.

Выше перечисленные способы используются в медицине уже долгое время и распространены по всему миру. Но ввиду того, что отрасль постоянно развивается, вводятся быстрые диагностические методы по установлению принадлежности к группе крови. Таким нововведением считается и «Эритротест».

Чтобы определить показатель данным способом необходимо иметь следующее оборудование:

  • Стандартный планшет с пятью лунками
  • Скарификатор для прокола и получения биологической жидкости
  • Стеклянная пипетка с резиновой грушей
  • Пипетка для забора реактивов
  • Палочки для смешивания компонентов

Основное преимущество эритротеста состоит в том, что исследование не требует дополнительных условий и доступно в тот момент, когда проведение стандартной диагностики невозможно. Последовательность проведения

В углублениях планшета размещают цоликлоны к антигенам поверхностного типа и основному, который отвечает за наследственную передачу резус-фактора. В последнюю лунку добавляют контрольную сыворотку, которая исключит ошибочный результат и верно укажет на принадлежность к той или иной группе.

  • Оценивание результатов анализа проводится с помощью таблицы, в ней указываются возможные результаты тестирования.

Группа крови, определение ее проводится исходя из специально разработанных норм. Существует определенная таблица, которая характеризует каждую группу крови.

Группы Описание
I (0) Эритроцитарные антигенные качества не наблюдаются
II (А) Присутствие антигена А
III (В) Наличие на поверхности эритроцитарных клеток антигена В
IV (АВ) Присутствие обоих антигенов

Оценка результата.

-чашки Петри

Данная техника заключается в определении агглютиногенов с помощью цоликлонов или стандартных сывороток с параллельным выявлением агглютининов при помощи эталонных эритроцитов.

Приложение 8. ИНСТРУКЦИЯ по определению резус-принадлежности крови на плоскости без подогрева и по изготовлению стандартной сыворотки и реактива антирезус, предназначенных для этой цели

Приложение 7

I. Введение

Определение резус-принадлежности заключается в выявлении в эритроцитах людей антигена D системы Резус.

В систему Резус входят шесть антигенов: D, d, C, c, E, e, которые определяют с помощью соответствующих антисывороток. Антиген d серологически не выявляется. Существуют также разновидности антигенов резус: D_U, C_W, c_v, c_x и другие.

     D – 85%

     C – 70%    c – 80%

     E – 30%    e – 97,5%

Антигены системы Резус обладают способностью вызывать образование изоиммунных антител.

Наиболее активным в этом отношении является антиген D, который и подразумевается под термином резус-фактор. Именно по наличию или отсутствию антигена D все люди делятся на резус-положительных и резус-отрицательных.

Определение резус фактора цоликлонами

Различные сочетания антигенов резус в крови отдельных людей составляют 28 групп системы Резус (Табл.1). В четырнадцати из них содержится антиген D – они являются резус-положительными, а другие четырнадцать не содержат антигена D (нижняя часть таблицы) – их относят к резус-отрицательным.

Таблица 1

Определение резус-принадлежности производится специалистом, имеющим специальную подготовку.

Определение резус-принадлежности реципиентов производится стандартной сывороткой анти-D, что дает возможность разделить их на резус-положительных (Rh ) и резус-отрицательных (rh-).

В отличие от реципиентов определение резус-принадлежности крови доноров производится в два этапа: сначала кровь доноров исследуется стандартной сывороткой анти-D, а затем кровь доноров, давшую отрицательную реакцию с сывороткой анти-D, исследуют дополнительно стандартными сыворотками антирезус, содержащими антитела анти-C и анти-E.

В число резус-отрицательных доноров зачисляются только лица, кровь которых дает отрицательную реакцию со всеми сыворотками, т.е. не содержит ни одного из этих трех антигенов резус D, C, E.

Иногда такие дополнительные исследования требуется проводить и у других лиц – у больных с подозрением на изосенсибилизацию и у беременных женщин.

Определение резус фактора цоликлонами

Результат определения резус-принадлежности крови доноров записывается в специальных листах или журнале и на лицевом листе донорского журнала (карточке) с указанием даты и за подписью лиц, производивших определение.

Результат определения резус-принадлежности крови больных и других лиц записывается в специальный журнал и на бланке с указанием даты и за подписью лиц, производивших определение. Этот бланк вклеивается в историю болезни и, кроме того, результат, указанный на этом бланке, записывается лечащим врачом в правом верхнем углу лицевого листа истории болезни и скрепляется его подписью с указанием даты.

Сыворотки антирезус изготавливаются обычно в виде “универсальных”, т.е. лишенных групповых антител анти-A и анти-B. Такие сыворотки пригодны для определения резус-принадлежности крови людей любой группы по системе ABO.

Однако, если изготовляются сыворотки антирезус различных групп по системе ABO, то в этих случаях при определении резус-принадлежности необходимо учитывать групповую специфичность сыворотки. Сывороткой антирезус группы O(I) определяется резус-принадлежность только в эритроцитах группы 0(I); сывороткой антирезус группы A(II) только в эритроцитах групп O(I) и A(II);

При каждом исследовании или проводимой серии исследований необходимо для проверки специфичности и активности сыворотки антирезус ставить контроль. Для контроля применяются стандартные резус-положительные эритроциты группы O(I) или той же группы, что и исследуемая кровь, и стандартные резус-отрицательные эритроциты.

О стандартных эритроцитах см. “Инструкцию по взятию и учету крови, получаемой от доноров малыми дозами для приготовления стандартных эритроцитов”.

Стандартные сыворотки для определения резус-принадлежности могут содержать резус-антитела разные по форме – полные и неполные (см. “Инструкцию по исследованию сыворотки на наличие резус-антител”). Каждые из этих антител активны только в особых условиях, поэтому методика определения резус-принадлежности зависит от того, какие резус-антитела находятся в стандартной сыворотке.

Метод использования каждой стандартной сыворотки антирезус указывается в сопроводительной инструкции.

Метод определения резус-принадлежности зависит от формы антител в стандартной сыворотке и способа ее изготовления.

При выдаче сыворотки антирезус к ней придается краткая сопроводительная инструкция с описанием того метода, для которого предназначена данная серия выдаваемой сыворотки.

Как определить группу в случае неверной трактовки результатов анализа

Группа и резус-фактор – генетически обусловленные характеристики крови, которые наследуются от родителей и остаются неизменными на протяжении всей жизни человека. Классификация групп крови осуществляется, исходя из определенного набора биохимических параметров и состава антигенов, и насчитывает 4 основных группы.

Переливание пациенту крови несовместимой группы или с другим резус-фактором несет с собой смертельную опасность – иммунная система начинает вырабатывать антитела против чужеродных клеток, которые атакуют и разрушают их. Именно по этой причине в ситуациях, которые несут с собой риск обширной кровопотери, необходимо точное определение принадлежности крови и резус-фактора как у донора, так и у реципиента.

Обязательно нужно соблюдать и все условия правильного проведения процедуры. Помещение должно иметь хорошо оборудованное рабочее место с температурным режимом и достаточным освещением. Если инструкция к препарату содержит указания и касательно требуемой влажности, следует учитывать и данный фактор.

Определение группы цоликлонами постепенно приобретает все большую популярность. Если раньше эта процедура проводилась исключительно в специализированных стационарах (к примеру, только в отделениях гематологии и хирургии), то сейчас процедура доступна почти в любой достаточно оборудованной лаборатории.

На платной основе проведение этой услуги предлагают и многие центры косметологии и частной медицины. Бесплатно данная процедура, как было сказано выше, проводится по направлению терапевта или лечащего врача.

Приложение 19. ИНСТРУКЦИЯ по изготовлению консервированных стандартных эритроцитов и их применению в изосерологических исследованиях

Приложение 4

—————-

* Составители инструкции: профессор И.Л.Чертков, директор ТОО “Гематолог” Г.Ю.Митерев, научные сотрудники Л.Н.Леменева, Н.И.Оловникова, Е.В.Белкина.ТУ 9398-205-27575295-94

Цоликлоны анти-А, анти-В и анти-АВ предназначены для определения групп крови человека системы АВ0 в прямых реакциях гемагглютинации и применяются взамен или параллельно с поликлональными иммунными сыворотками.

Моноклональные анти-А и анти-В антитела продуцируются двумя мышиными гибридомами и принадлежат к иммуноглобулинам класса М. Цоликлоны изготавливаются из асцитной жидкости мышей – носителей анти-А и анти-В гибридом. Цоликлон анти-АВ представляет собой смесь моноклональных анти-А и анти-В антител. Технология изготовления реагента исключает возможность его контаминации патогенными для человека вирусами.

Определение производится в нативной крови, взятой в консервант; в крови, взятой без консерванта, в том числе взятой из пальца. Используется метод прямой гемагглютинации на плоскости: и на пластине или планшете. Определение группы крови производится в помещении с хорошим освещением при температуре 15-25 град.С.

3.1. Нанесите на планшет или пластину индивидуальными пипетками цоликлоны анти-А, анти-В и анти-АВ по одной большой капле (0,1 мл) под соответствующими надписями.

3.2. Рядом с каплями антител нанесите по одной маленькой капле исследуемой крови (0,01-0,03 мл).

3.3. Смешайте кровь с реагентом.

3.4. Наблюдайте за ходом реакции с цоликлонами визуально при легком покачивании пластины или планшета в течение трех минут. Агглютинация эритроцитов с цоликлонами обычно наступает в первые 3-6 секунд, но наблюдение следует вести три минуты ввиду более позднего появления агглютинации с эритроцитами, содержащими слабые разновидности, антигенов А или В.

3.5. Результат реакции в каждой капле может быть положительным или отрицательным. Положительный результат выражается в агглютинации (склеивании) эритроцитов. Агглютинаты видны невооруженным глазом в виде мелких красных агрегатов, быстро сливающихся в крупные хлопья. При отрицательной реакции капля остается равномерно окрашенной в красный цвет, агглютинаты в ней не обнаруживаются.

3.6. Интерпретация результатов реакции агглютинации исследуемой крови с цоликлонами представлена в таблице.

——————————————————————- ¦    Результат реакции*           ¦   Исследуемая кровь принадлежит ¦¦    с цоликлоном:                ¦            к группе**           ¦ ———————————¦                                 ¦¦анти-А   ¦  анти-В   ¦  анти-АВ  ¦                                 ¦ ——— ———– ———– ———————————¦¦  –      ¦    –      ¦     –     ¦               0(I)              ¦¦         ¦           ¦           ¦                                 ¦¦        ¦    –      ¦          ¦               А(II)             ¦¦         ¦           ¦           ¦                                 ¦¦  –      ¦          ¦          ¦               В(III)            ¦¦         ¦           ¦           ¦                                 ¦¦        ¦          ¦          ¦               АВ(IV)            ¦¦         ¦           ¦           ¦                                 ¦ ——————————————————————-

* Знаком плюс ( ) обозначено наличие агглютинации,

знаком минус (-) -отсутствие агглютинации.

** Окончательно АВ0 принадлежность устанавливается только по результатам перекрестного определения: антигенов А и В на эритроцитах и изогемагглютининов в сыворотке.

В составе цоликлонов нет высокомолекулярных добавок, способных вызвать неспецифическую полиагглютинацию эритроцитов, поэтому не требуется проведение контроля с растворителем. При положительном результате реакции агглютинации со всеми тремя цоликлонами необходимо исключить спонтанную неспецифическую агглютинацию исследуемых эритроцитов.

Цоликлоны выпускаются в жидкой форме во флаконах объемом 5-10 мл. Цоликлон анти-А – красного цвета, анти-В – синего и анти-АВ – бесцветный. В качестве консерванта применяется азид натрия в конечной концентрации 0,1%.

Срок хранения – два года при температуре 2-8 град.С. Вскрытый флакон можно хранить при температуре 2-8 град.С в закрытом виде в течение одного месяца.

Приложение 9

—————-

* Составители инструкции: профессор И.Л.Чертков, директор ТОО “Гематолог” Г.Ю.Митерев, научные сотрудники Л.Н.Леменева, Н.И.Оловникова, Е.В.Белкина.

ЦОЛИКЛОНА анти-D предназначен для выявления D антигена системы резус в эритроцитах человека и применяется в серологических тестах взамен или параллельно с изоиммунной анти-D сывороткой.

Порядок установления резус-принадлежности крови определен “Инструкцией по определению резус-принадлежности крови”, утвержденной Министерством здравоохранения Российской Федерации в 1997 году и Методическими рекомендациями по определению резус-принадлежности крови, утвержденными ГНЦ РАМН 27 апреля 1994 года.

Действующим началом ЦОЛИКЛОН Анти-D являются моноклональныа анти-D антитела, продуцируемые лимфобластоианой линией клеток человека, полученной из лимфоцитов донора, гипериммунного против D антигена. Антитела, продуцируемые клетками одного клона, являются моноклональными, принадлежат к одному классу иммуноглобулинов, полностью идентичны по структуре и биологической активности.

Поскольку линия клеток, секретирующих моноклональные анти-D антитела, получена из лимфоцитов здорового донора, исключена контаминация реагента патогенными вирусами (гепатит, СПИД и др.). Однако с исследуемыми образцами крови следует работать в перчатках во избежание заражения патогенными вирусами, передающимися через кровь.

ЦОЛИКЛОН Анти-D представляет собой неразбавленную или разведенную солевым раствором культуральную жидкость, кондиционированную клетками-продуцентами антител. Анти-D моноклональные антитела принадлежат к иммуноглобулинам класса G(IgGl). ЦОЛИКЛОН Анти-D не содержит антител иной специфичности и поэтому может быть использован для выявления D антигена в эритроцитах любой группы крови.

Анти-D антитела, принадлежащие к иммуноглобулинам класса G (неполные антитела), не вызывают прямой агглютинации эритроцитов, содержащих D антиген, и могут быть использованы в реакции конглютинации с желатином, непрямом антиглобулиновом тесте (пробе Кумбса), в реакции агглютинации эритроцитов, обработанных протеолитическими ферментами, в том числе в автоматизированных системах типа “Группоматик”.

Определение D-антигена производится в нативной крови, стабилизированной с помощью применяемых консервантов; в крови, взятой без консерванта; в крови, взятой из пальца. Наиболее четкая реакция агглютинации наблюдается при использовании высокой концентрации эритроцитов. Заключение о присутствии D-антигена в исследуемых эритроцитах делают по наличию положительной реакции агглютинации.

Является наиболее чувствительным методом выявления D антигена. Взвесь (2-3%) в физиологическом растворе трижды отмытых исследуемых эритроцитов помещают в круглодонную пробирку (0,1 мл взвеси эритроцитов) или 96-ячеечную круглодонную плату (0,05 мл/ячейку), добавляют равный объем ЦОЛИКЛОНА и инкубируют в течение 45-60 минут при 37 град.С.

Затем после однократного отмывания физиологическим раствором к осадку эритроцитов добавляют 0,05-0,1 мл антиглобулиновой сыворотки, тщательно перемешивают и немедленно или через 15-30 минут инкубации при комнатной температуре центрифугируют при 200 g в течение 15-20 секунд. Осадок мягко взвешивают и по наличию агглютинатов, выявляемых макро- или микроскопически, делают заключение о присутствии D антигена в исследуемых эритроцитах.

В агглютинационную пробирку вносят одну каплю (0,05-0,1 мл) свободных эритроцитов из сгустка свернувшейся крови или эритроцитов, отмытых от консерванта. Затем добавляют две капли (0,1-0,2 мл) 10% раствора желатина, предварительно прогретого при 45-50 град.С до разжижения, и одну каплю ЦОЛИКЛОНА Анти-D.

Суспензию тщательно перемешивают, инкубируют 10-15 минут в водяной бане или 30 минут в термостате при 48 град.С, прибавляют 5-6 мл физиологического раствора и после осторожного переворачивания пробирки визуально определяют наличие агглютинатов. Агглютинация эритроцитов свидетельствует о присутствии в них D антигена.

Полиглюкин практически всегда вызывает неспецифическую агглютинацию D-отрицательных эритроцитов, поэтому невозможно объективное заключение об отсутствии D антигена или о наличии его слабого варианта в исследуемых эритроцитах. В связи с этим использование полиглюкина для моноклональных антител не рекомендуется.

ЦОЛИКЛОН Анти-D, содержащий моноклональные антитела класса IgG, способен вызывать прямую агглютинацию D-положительных эритроцитов, обработанных такими протеолитическими ферментами как бромелин, папаин и др., и поэтому может применяться в автоматических системах типирования крови.

Для контроля специфичности при каждом исследовании (независимо от применяемой методики исследования) необходимо использовать стандартные D-положительные и D-отрицательные эритроциты. Желательно также включение образцов со слабовыраженным D антигеном.

ЦОЛИКЛОН Анти-D выпускается в жидкой форме во флаконах объемом 5 или 10 мл (1 мл содержит 10 доз). В качестве консерванта применяется азид натрия в конечной концентрации 0,1%.

Срок хранения – два года в холодильнике при 2-8 град. С. Вскрытый флакон можно хранить в холодильнике в течение одного месяца в закрытом виде.

Приложение 10

—————-

ЦОЛИКЛОН анти-D Супер предназначен для выявления антигена D системы резус в эритроцитах человека.

В связи с тем, что IgM антитела не вызывают агглютинации некоторых образцов эритроцитов со слабовыраженным D антигеном (D_u), образцы донорской крови, которые при исследовании ЦОЛИКЛОНОМ анти-D Супер были определены как D-отрицательные, необходимо дополнительно тестировать с помощью анти-D реагентов, содержащих IgG-антитела (поликлональной сывороткой или моноклональным анти-D IgG реагентом).

Оцените статью
Медицинский блог